laura reguilón gallego¹, ASCENSION MARIA DE LOS REYES-GARCIA PASTOR¹, MARIA PIEDAD FERNÁNDEZ PÉREZ¹, SONIA ÁGUILA MARTÍNEZ¹, NURIA GARCÍA BARBERÁ¹, Laura Zapata Martínez², Maria Carmen Ábalos³, Encarnación Saiz⁴, Maria Teresa Herranz⁴, Mari Fran Pina⁴, Ana Barceló⁵, Ignacio Hervés⁵, Vicente Vicente García¹, Rosario López Pedrera³, CONSTANTINO MARTÍNEZ GÓMEZ¹, Rocío González-Conejero Hilla¹

(1) HEMATOLOGÍA Y ONCOLOGÍA MÉDICA CLÍNICO-EXPERIMENTAL, IMIB-Arrixaca, España
(2) Centro Regional de Hemodonación, 30540, España (Región de Murcia)
(3) UGC Reumatología. Instituto Maimónides de Investigación Biomédica de Córdoba (IMIBIC). Hospital Universitario Reina Sofía. Universidad de Córdoba. Córdoba, España (Andalucía)
(4) Servicio de Medicina Interna. H.U.J.M. Morales Meseguer. Murcia, España (Región de Murcia)
(5) Servicio de Radiodiagnóstico. H.U.J.M. Morales Meseguer. Murcia, España (Región de Murcia)

La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad autoinmunitaria sistémica que condiciona la presencia de comorbilidades tales como la enfermedad cardiovascular, donde podría ser importante la inmunotrombosis. Así, los productos derivados de NETosis pueden tener potencial diagnóstico tanto para la actividad de la enfermedad como para la aterosclerosis asociada. Nuestro grupo ha descrito que los niveles de NET en plasma se asocian al genotipo rs2431697 de miR-146a, un regulador negativo de la via NF-kB, en pacientes tanto con fibrilación auricular como con sepsis; en estos grupos los portadores del alelo T (50% de miR-146a) tienen significativamente más riesgo de eventos cardiovasculares. Nuestro objetivo fue explorar si rs2431697 está involucrado en la regulación de los niveles de NET y su relación con el desarrollo de complicaciones cardiovasculares en pacientes con AR.

Recogimos plasma y ADN de pacientes no seleccionados diagnosticados de AR, así como variables clínicas en el momento de recogida de la muestra y al diagnóstico. Además recogimos muestras de 50 voluntarios sanos. Realizamos el genotipado de rs2431697 usando sondas TaqMan y evaluamos en plasma los NET cuantificando ADN libre (cfDNA) usando SYTOX Green y los complejos histona H3 citrulinada (citH3)/ADN por ELISA. Evaluamos la presencia de placas de ateroma y la medida del grosor de la íntima carotidea (GIMC) medida mediante ultrasonografía Doppler, definimos el daño vascular como la presencia/ausencia de placas de ateroma.

Disponemos de muestras de 359 pacientes [edad media 55 (28-87), mujeres 72%, 238 (66%) sin fármacos biológicos y 121 (34%) los reciben o los han recibido en su evolución] y 50 controles [edad media 43 (35-47) y 72% mujeres]. La frecuencia de los genotipos rs2431697 se presenta en la Tabla 1, sin que observáramos diferencias entre controles y pacientes. Sin embargo observamos una mayor proporción de portadores del alelo T en los pacientes con biológicos (p=0,05). Entre los pacientes con biológicos, los complejos citH3/ADN fueron significativamente mayores en los pacientes TT (Fig. 1). Por último, con los datos preliminares de la evaluación del GIMC (128 pacientes) observamos que los valores tanto de cfDNA (Fig. 2A) como de citH3/ADN (Fig. 2B) fueron significativamente más elevados en los pacientes con daño vascular (59 vs 34; p=0,03; 57 vs 34; p=0,02, respectivamente). De forma interesante, los niveles de citH3/ADN más altos en el grupo de CIMC patológico, correspondieron a portadores del alelo T (Fig. 2B)

Estos resultados confirman que la NETosis tiene un papel relevante en la fisiopatología de la AR. Además, describimos que el genotipo rs2431697-T de miR-146a se asocia con el requerimiento de fármacos biológicos y con mayor grosor de la íntima en los portadores. Por tanto, los niveles de miR-146a podrían influir tanto en el curso clínico como en las comorbilidades trombóticas asociadas a la enfermedad.